大肠菌群测试片是什么?这篇文章告诉你
大肠菌群是指在一定培养条件下能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌它是评价食品卫生质量的重要指标之一目前已被广泛应用于食品卫生检验工作中
大肠菌群多存在于温血动物粪便人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方大肠菌群数的高低表明了食品及食品生产过程中受污染的程度目前大肠菌群的检测的传统方法主要包括GB4789.3-2008SN/T1896-2007SN/T0169-2010等
Petrifilm是美国3M公司发明的一种进行菌落计数的干膜有操作简单检测周期短等优点它一旦投入使用将大大缩短检测周期简化实验操作并取得较大的经济收益
原理
Petrifilm大肠菌群测试片采用可再生的水合物干膜由上下两层薄膜组成上层聚丙烯薄膜含有粘合剂指示剂及冷水可溶性凝胶下层聚乙烯薄膜含有大肠菌群生长所需的VRB培养基大肠菌群在发育时产生琥珀酸脱氢酶将上层薄膜中的指示剂还原成红色非溶解性三苯甲从而使细菌着色另测试片表面覆盖的薄膜可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体故测试片上红色菌落周围有气泡者为大肠菌群
样品处理
取样品25mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内制成1:10的样品匀液用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内振摇后成为1:100的稀释液
接种
一般食品选1~2个稀释度进行检测含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测将大肠菌群测试片置于平坦实验台面揭开上层膜用无菌吸管吸取1mL样品匀液垂直滴加到测试片中央处然后再将上层膜缓慢盖下避免产生气泡使用压板(平面底朝下)放置在上层模中央处轻轻的压下使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上切勿扭转压板拿起压板静置至少1min使培养基凝固
培养
测试片的透明面朝上置于恒温培养箱内堆叠片数不超过20片培养温度为36℃±1℃培养24±2h
结果判读
培养后大肠菌群在测试片上显红色可目视用菌落计数器放大镜或Petrifilm自动判读仪计数并可参考判读手册计数菌落数